人β干擾素（IFN-β）ELISA試劑盒的特點。

β干擾素(IFN-β)是一種在抗病毒固有免疫應答過程中具有重要作用的細胞因子,而肝細胞作為肝炎病毒的宿主細胞被認為具有IFN-β誘生的能力。

選用畢赤酵母GS115為宿主,利用營養缺陷型、抗生素G418和免疫斑點法的組合篩選得到的轉化子產量高達180 mg/L。經Western Blot實驗驗證,表達出的融合蛋白在結構上符合我們的要求。經過對菌株的搖瓶表達條件優化,利用有機培養基,接種、培養至36 h后轉入pH6.0、甲醇濃度2%、誘導濃縮比3:1的條件下誘導表達,可得到218 mg/L的表達量。在5 L發酵罐的放大試驗中,當發酵至100 h時菌濃和產量均達到zui高值,菌濃A600為350,表達量為500 mg/L。經過對于融合蛋白IFNβ-HSA的初步純化條件的摸索,對其吸附、解吸附行為的規律有了進一步的了解。進而制定了新的純化工藝,經過超濾濃縮、染料親和層析、鎳離子螯合親和層析、陰離子交換層析幾步分離得到了純度大于95%的目的蛋白純品,總回收率達到17%。

人β干擾素（IFN-β）ELISA試劑盒的特點。

與Huh7和HepG2細胞相比,PH5CH8細胞經NDV與poly(I∶C)誘導可產生高水平的IFN-β。進一步利用蛋白免疫印跡法比較3株細胞系內IFN-β誘生信號通路相關蛋白的表達水平,結果顯示,與PH5CH8細胞相比,Huh7和HepG2細胞內多種信號蛋白的表達水平偏低。

人β干擾素-人血清白蛋白融合蛋白(IFNβ-HAS)的臨床前研究,本研究采用免疫學方法對畢赤酵母轉化子進行篩選,得到高產菌株8株。在5L發酵罐上對高產菌株進行誘導表達,產量達500mg/L。發酵液經超濾濃縮、染料親和層析、鎳離子螯合親和層析和DEAE離子交換層析純化后,融合蛋白純度達到96%。Westernblotting雜交表明融合蛋白具有人血清白蛋白和人β干擾素的抗原性,細胞病變抑制法測定IFNβ-HSA比活性為1.96×107IU/mg。建立了融合蛋白的生物試劑工藝,為IFNβ-HSA的臨床前研究奠定了基礎。

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