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超氧化物歧化酶(SOD)提取液使用說明

更新時(shí)間:2019-04-12      瀏覽次數(shù):3590

超氧化物歧化酶(SOD)提取液使用說明

 

超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD),別名肝蛋白、簡稱:SOD。SOD是一種源于生命體的活性物質(zhì),能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)。對(duì)人體不斷地補(bǔ)充SOD具有抗衰老的特殊效果。

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD)是1938年從牛紅血球中分離得到超氧化物歧化酶開始算起,人們對(duì)SOD的研究己有七十多年的歷史。1969年McCord等重新發(fā)現(xiàn)這種蛋白,并且發(fā)現(xiàn)了它們的生物活性,弄清了它催化過氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)的性質(zhì),所以正式將其命名為超氧化物歧化酶。

操作方法;

1、植物組織樣品:取正常或逆境下的新鮮植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按植物組織:超氧化物歧化酶(SOD)提取液=的比例,加入預(yù)冷的超氧化物歧化酶(SOD)提取液,冰浴情況下充分搗碎或研磨,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液沖洗研缽或勻漿器,合并沖洗液至該離心管,補(bǔ)加超氧化物歧化酶(SOD)提取液至10ml,離心10min,取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的測(cè)定。

2、動(dòng)物組織樣品:動(dòng)物用含有20U/ml Heparin的生理鹽水(0.9% NaCl containing 20U/ml Heparin)灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg組織加入500μl SOD檢測(cè)緩沖液的比例,用玻璃勻漿器在4℃或冰浴勻漿,離心10min,取上清液(SOD粗提液用于酶活性的測(cè)定。

3、血漿或含紅細(xì)胞的樣品:從待測(cè)樣品中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,如果含有應(yīng)去除紅細(xì)胞后檢測(cè),如超過檢測(cè)范圍,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀釋后檢測(cè)。血清去除紅細(xì)胞的簡易方法如下:用抗凝管收集血液,顛倒混勻,取至少500μl全血,4℃ 3000g離心5min,轉(zhuǎn)移上清至另一新的1ml離心管中,適量生理鹽水稀釋后待測(cè)。亦可采用紅細(xì)胞裂解液去除紅細(xì)胞,如Leagene ACK紅細(xì)胞裂解液等。

 

注意事項(xiàng):

1、 待測(cè)樣品中不能含有磷酸酶抑制劑,同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2、 所測(cè)樣本的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限,用超氧化物歧化酶(SOD)提取液稀釋樣品后重新測(cè)
定。

3、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

 

超氧化物歧化酶(SOD)提取液使用說明

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