1. 為什么這個DMEM培養(yǎng)基是鮮紅色的？

培養(yǎng)基的顏色主要是酚紅來顯示的，酚紅指示顏色非常靈敏，p值范圍為6-8，顏色由黃變?yōu)樽霞t。酚紅不是必須的，在有些情況下甚至是多余的，酚紅有類似固醇類激素的作用，如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)，盡量不要添加。但是為了培養(yǎng)方便，能讓我們直觀地感覺培養(yǎng)液的狀況，加入酚紅后，如果培養(yǎng)液偏酸了，就顯示偏黃色，偏堿性了就顯示偏紫色。

2. 為什么培養(yǎng)皿放在一個沒有開啟CO2的孵箱里面，培養(yǎng)液顏色偏紫色？
一般的DMEM使用的緩沖體系是NaHCO3， 初中的時候應(yīng)該見過如下的方

2NaHCO3=Na2CO3+CO2+H2O

在沒有CO2的孵箱中，培養(yǎng)液中的CO2一直溢出，碳酸變少了，溶液變堿性了，就偏紫色了。 同時我們打開了很久的DMEM瓶里面的培養(yǎng)液也會慢慢偏紫色，也就是這個道理。

3. 什么時候溶液會變?yōu)辄S色？
一般污染細(xì)菌的時候或者長時間不換液，溶液變?yōu)辄S色主要是酸性物質(zhì)太多，細(xì)菌和細(xì)胞過度增長都會產(chǎn)生酸性物質(zhì)，溶液會變?yōu)辄S色。

4. 培養(yǎng)基偏紫色了還能用不？
可以將該偏紫色的培養(yǎng)基置于CO2孵箱中，擰松瓶蓋。一段時間之后你會發(fā)現(xiàn)顏色變?yōu)轷r紅色了，那么可以繼續(xù)接著用。但是不要使用過長時間未用完并且變色的培養(yǎng)液，置于空氣下氧化之后培養(yǎng)基成分可能已發(fā)生了變化。

5. 哪些情況下不得使用酚紅？
如前面所說的酚紅有類似固醇類激素的作用，如果涉及到固醇類激素相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)，不要添加。另外在做流式細(xì)胞的時候，酚紅會對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此也不要添加。

6. 有沒有不受CO2影響的培養(yǎng)基？
有，如果緩沖體系不是NaHCO3，而是其他體系如HEPES，就不受CO2的影響。

7. 常用的培養(yǎng)基有哪些？
MEM（Minimum Essential Medium）: 也稱低必須培養(yǎng)基，它僅含有12種必須氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。可以廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞培養(yǎng)。

DMEM：分為高糖和低糖，碳酸氫鈉緩沖體系，所以需要CO2。
高糖的適合于高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的細(xì)胞。 低糖的適合于生長速度較快，附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。

DMEM/F12：F12 培養(yǎng)基成分復(fù)雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ)，以利用F12含有較豐富成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。

RPMI-1640：主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，廣泛用于哺乳物，特殊造血細(xì)胞，正常或者惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞。 另外K-562， L-60、urkat、IM-9 等淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞也可以使用。

McCoy’s 5A : 主要用于肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)， 還可以用于骨髓、皮膚、肺等原代培養(yǎng)，用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。比如HT29，BHL100等上皮細(xì)胞。

IMDM（Iscove’s Modified Dulbecco Medium）：主要用于紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體培養(yǎng)。培養(yǎng)液中含有微量元素硒以及額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉以及HEPES。

M199 Medium 是具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)時必須輔助血清才能長期培養(yǎng)。

L-15(Leibovitz Medium) 適用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株，用于快速增值瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。

Ham’s F-10: 適用于小鼠細(xì)胞以及人的二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)

Ham’s F-12: 適用于單細(xì)胞培養(yǎng)或者克隆培養(yǎng)， 是無血清培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

MCDB131： 適用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞。

Opti-MEM I Reduced Serum Media: 適用于培養(yǎng)造血細(xì)胞。