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信帆生物細胞涂片固定液-細胞涂片常用的固定液

更新時間:2020-12-23      瀏覽次數:1245

信帆生物細胞涂片固定液-細胞涂片常用的固定液

 

在氣液色譜和液液色譜中作為固定相的液體稱為固定液。在氣液色譜中,這種液體固定相又稱為液相(liquid phase)。

 

規格:500ml
保存:室溫,
有效期:12個月
用途:細胞涂片常用的固定液,滲透力強,可加快細胞的固定。
說明:主要由乙醇、YM組成,主要用于細胞涂片固定,滲透力強,可加快細胞的固定。

 

固定液的要求:1、揮發性小,操作溫度下有較低蒸氣壓,以免流失
2、熱穩定性好,操作溫度下不發生分解和聚合反應,并且液體狀態,保持固定液原來的特性
3、對試樣有一定的溶解能力,以免被測組分被帶走起不到分配作用
4、具有良好的選擇性,即操作條件下,對沸點相近或者性質相似的不同物質有盡可能高的分離能力

 

培養細胞常用固定劑有4%多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95%乙醇。在固定之前需用37℃預熱的PBS輕洗細胞。
1.4%多聚甲醛磷酸緩沖液 固定10―20分鐘,干燥。
2.甲醇 10‰甲醇固定5―20分鐘,自然干燥。
3.丙酮 4℃冷丙酮固定組織穿透性和脫水性強,抗原保存好,很少用于組織切片,常用于培養細胞和細胞涂片的固定,平時丙酮4℃低溫保存備用,臨用時,將載玻片插入冷丙酮內5~10分鐘,取出后自然于燥。
4.乙醇 95%乙醇脫水性強,易引起組織收縮、變硬,影響切片質量,因而固定時間不宜過長(2小時內)。乙醇使蛋白變性程度輕,固定后蛋白可再溶解,在染色中孵育時間長的情況下,抗原可流失,并減弱反應強度。
5.乙mi 與乙醇等量混合對組織穿透性*,即使涂片上含較多的黏液,固定效果仍較好,是理想的細胞固定液。
培養細胞固定之后晾干可使細胞牢固地黏附在載玻片上,故對于容易脫落的細胞應延長晾干時間。晾干之后PBS漂洗3次,然后進行組織化學或免疫組織化學染色。
用于免疫組織化學的固定劑種類很多,不同的抗原和標本均可選醛類固定液,如效果不佳,再試用其他固定液。選擇固定液的標準:一是能保持組織細胞的形態結構;二是大限度地保存抗原免疫活性和被檢物不被丟失。一些含重金屬固定液可用于組織化學標本的固定,但在免疫組織化學染色中禁用。

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