溶酶體紅色熒光探針工作液的配置

更新時(shí)間：2021-02-02

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溶酶體紅色熒光探針工作液的配置

Lyso-Tracker Red是一種溶酶體(lysosome)紅色熒光探針，可以用于活細(xì)胞溶酶體特異性熒光染色。

Lyso-Tracker Red可以選擇性地滯留在偏酸性的溶酶體中，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)于溶酶體的特異性熒光標(biāo)記。中性紅(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以對(duì)溶酶體進(jìn)行熒光染色，但中性紅和吖啶橙的染色缺乏特異性。

使用說(shuō)明：

1. Lyso-Tracker Red工作液的配制：

a. 取少量Lyso-Tracker Red按照1:13333-1:20000的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液或適當(dāng)?shù)娜芤?例如含鈣鎂離子的HBSS)中，使終濃度為50-75nM。例如取1µl Lyso-Tracker Red加入到20ml或13.33ml細(xì)胞培養(yǎng)液或適當(dāng)?shù)娜芤?例如含鈣鎂離子的HBSS)中?；靹蚝蠹礊長(zhǎng)yso-Tracker Red工作液。HBSS with Ca2+ & Mg2+ 。

b. Lyso-Tracker Red工作液使用前需37℃預(yù)溫育。

注：工作液中Lyso-Tracker Red的濃度可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。為降低背景，在染色效果可以接受的范圍內(nèi)，建議盡量使用較低濃度的Lyso-Tracker Red。

2. 溶酶體的熒光標(biāo)記：

a. 去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入步驟1配制好的并37℃預(yù)溫育的Lyso-Tracker Red染色工作液，與細(xì)胞37℃共孵育30-120分鐘。

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：

elisa試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。

培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。

血清：胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清。

生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品：進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.

抗體：一抗,二抗，流式抗體等。

酶免檢測(cè)服務(wù)：進(jìn)口酶免檢測(cè)服務(wù)，國(guó)產(chǎn)酶免檢測(cè)服務(wù)，進(jìn)口美國(guó)鳳凰等酶免檢測(cè)服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù)：酶免代測(cè)，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測(cè)，熒光定量PCR代測(cè)，病理細(xì)胞染色代測(cè)，生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。

b. 去除Lyso-Tracker Red染色工作液，加入新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)液。

c. 隨后通常用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時(shí)可觀察到溶酶體呈明亮的強(qiáng)熒光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Lyso-Tracker Red染色工作液中Lyso-Tracker Red的濃度或在推薦的時(shí)間范圍內(nèi)適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。

注意事項(xiàng)：

Lyso-Tracker Red(1mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。對(duì)于微量的液體，每次使用前先離心數(shù)秒鐘，使液體充分沉降到管底。

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