二：保存條件

本試劑盒三個月內使用可4℃儲存，長期可置-20℃。

三：說明

本試劑盒可用于從血液中分離完整而純化的線粒體。

其制備物，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。但不適用于進一步DNA提取。

四：操作步驟

1. 血液處理：

血液要求：非肝素鈉抗凝血，使用新鮮血液。對于陳舊血液，由于凍凝過程中冰晶已經對細胞核膜和線粒體膜產生損傷，所以線粒體得率會大大減少，并且完整性也會降低。

a. 對于無核紅細胞全血（如哺乳動物處周血），取血約5ml（適當分成幾管），加入3倍體積的紅細胞裂解液（稀釋后的工作液,下同），混勻，800 × g  5 min離心收集白細胞。加入1-2ml紅細胞裂解液（稀釋后的工作液），吹打重懸白細胞，合并于一管中，800 × g 5~10 min離心收集白細胞。此時如果白細胞有可見紅色，可再次用少量(0.5ml)紅細胞裂解液洗細一次。

b. 對于有核紅細胞全血（如禽類全血），取約200-300ul全血，800 × g 5~10 min離心收集全細胞，用生理鹽水或者PBS清洗兩次，留沉淀去上清。清洗時請用去尖吸頭吹打。

2. 在收集到的細胞中，加入1.0 mL冰預冷的白細胞裂解液重懸細胞，將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿器內，0℃冰浴研磨20~40次；

3. 勻漿物轉移到離心管，4℃，1000× g 離心5 min；

4. 取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000× g 再次離心5 min（一共兩次離心，完整去核）。

5．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管，線粒體沉淀在管底；