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文章標(biāo)題《柴胡軟堅(jiān)消癭顆粒對肝郁脾虛型橋本甲狀腺炎大鼠Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影響》

摘要：目的探討柴胡軟堅(jiān)消癭顆粒對肝郁脾虛型橋本甲狀腺炎大鼠輔助性T細(xì)胞1（helper T cell 1,Th1）/輔助性T細(xì)胞2（helper T cell 2,Th2）、輔助性T細(xì)胞17（helper T cell 17,Th17）/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell,Treg）平衡的影響。方法隨機(jī)數(shù)字表法將48只大鼠分為正常組（12只）和造模組（36只）,采用甲狀腺球蛋白注射結(jié)合高碘飲水+慢性束縛+游泳過勞+飲食失節(jié)制備肝郁脾虛橋本甲狀腺炎大鼠模型,共33只大鼠造模成功,將造模成功大鼠隨機(jī)分為模型組、金水寶片[0.45 g/（kg•d）]和柴胡軟堅(jiān)消癭顆粒組[11.43 g/（kg•d）],每組11只,連續(xù)給藥8周。觀察大鼠一般情況,實(shí)驗(yàn)前后記錄大鼠體重、攝食量、糞便含水量,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后曠場實(shí)驗(yàn)分析大鼠行為;末次給藥后12小時(shí),取血,流式細(xì)胞術(shù)檢測Th1、Th2、Th17、Treg細(xì)胞百分比;酶聯(lián)免疫吸附法檢測大鼠血清甲狀腺球蛋白抗體（thyroglobulin antibody, TGAb）、甲狀腺過氧化酶抗體（thyroid peroxidase antibody,

Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。

ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。