科研細胞-人肺微血管內皮細胞

培養基內皮細胞專用培養基：500mlECM+25mlFBS+5mlECGS+5mlP/S

傳代方法復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養基的離心管內，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養基的T25瓶中，放入培養箱培養。

細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶替代物；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶替代物輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續消化），直接吸掉胰酶替代物，加入5-6mL完全培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當的完全培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。；④注意培養基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

生長條件培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣；

生長特性貼壁生長

存儲條件液氮

類型肺微血管內皮細胞

安全等級1

形態內皮細胞，短梭形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈