科研試劑-人包皮成纖維細胞

培養基 HFF-1細胞專用培養基：84%DMEM-H+15%FBS+1%丙酮酸鈉 

傳代方法 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養基的離心管內，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養基的T25瓶中，放入培養箱培養。

細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當的完全培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。；④注意培養基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。 

生長條件 37℃；5%CO2+95%空氣； 

生長特性 貼壁生長 

存儲條件 液氮 

安全等級 1 

形態 成纖維細胞樣，長梭形，邊緣不規則，單層貼壁生長 

分離基物 取白人新生男孩的包皮制備獲得 

應用領域 可供HN4、HN1、H1、H9等hES的飼養層細胞使用。