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人免疫球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒原來是這樣

更新時間:2023-06-26      瀏覽次數(shù):476

人免疫球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒原來是這樣


免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,縮寫:IgA),是血清中的含量僅次于IgG,占血清免疫球蛋白的10~20%,存在于黏膜組織,例如消化道、呼吸道以及泌尿生殖系統(tǒng)。


產(chǎn)品名稱:
人免疫球蛋白A(IgA)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T
儲存條件:
2-8℃
有效期:6個月


檢測原理:
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人免疫球蛋白AIgA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并澈底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人免疫球蛋白AIgA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


實驗步驟(僅供參考)
1. 從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL
3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


注意事項:
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶玩全溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4.  嚴格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.  所有液體組分使用前充分搖勻。
6.本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

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