ELISA和生化樣本的準備要求有哪些

南京信帆生物通過ELISA和生化實驗檢測服務，樣本的準備方法如下，以下所有樣本必須盡量新鮮！

1、動植物組織樣本（干冰運輸）

準確稱取動物組織重量按重量（mg）：體積（μL）=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質（推薦0.9%的生理鹽水），冰水浴條件下，研磨儀（KZ-5F-3D）勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000rpm/min，離心10min，取上清液進行測定。

2、血清樣本（干冰運輸）

全血標本請于室溫放置2h內或4℃過夜后于4℃ 3000rpm/min離心15min，取上清即可立即檢測；或進行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

3、血漿樣本（干冰運輸）

1.生化、ELISA：可用肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于4℃ 3000rpm/min離心15min，取上清即可立即檢測；或進行分裝，并將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心，然后檢測。

2.凝血四項：抽取靜脈血，按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%（或3.2%）的枸櫞酸鈉抗凝管中，輕輕顛倒10次使之充分混勻，不得有凝塊，不得形成泡沫。

3.采樣后應盡快分離血漿（60分鐘內進行），將標本以3000rpm/min離心10-15min，使血漿分層，取上層血漿。

4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運輸。

4、細胞樣本

貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來，將培養液3000rpm/min，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細胞：將培養液3000rpm/min，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

細胞上清：標本于4℃，3000rpm/min離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

5、全血樣本（4℃運輸）

EDTA抗凝管取適量抗凝全血。EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊。抗凝全血僅用于血常規檢測，不可運輸后再離心取血漿。

ELISA和生化樣本的準備要求有哪些