脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑(可取代Lipo2000)
產(chǎn)品描述
脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，可替代Lipo2000，且與Lipo2000比其毒性更低，轉(zhuǎn)染效率更高。
本產(chǎn)品適合于將核酸（DNA和RNA）轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞，具有低細(xì)胞毒性；對(duì)多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率；轉(zhuǎn)染時(shí)血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點(diǎn)。
本產(chǎn)品適用范圍：貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞（哺乳動(dòng)物細(xì)胞系）的轉(zhuǎn)染。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率高，可替代Lipo2000，重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)單。
2. 無明顯細(xì)胞毒性，抗血清干擾，用脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，72小時(shí)內(nèi)不更換培養(yǎng)液無明顯細(xì)胞毒性。使用脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率，這樣可以減少去除血清對(duì)細(xì)胞的損傷。
3.脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑適用范圍廣，適用于核酸（DNA和RNA）在多種類型細(xì)胞和培養(yǎng)器皿上的轉(zhuǎn)染。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
為了更明顯看出轉(zhuǎn)染效率的差異，選擇DNA:轉(zhuǎn)染試劑相對(duì)較少的極限情況，分別用脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑與進(jìn)口T公司Lipo2000在293（常用的轉(zhuǎn)染細(xì)胞）和786-0（細(xì)胞狀態(tài)相對(duì)較差）兩種細(xì)胞上轉(zhuǎn)染pLJM1-EGFP質(zhì)粒，24h或48h后用熒光顯微鏡觀察綠色熒光表達(dá)情況，判斷轉(zhuǎn)染效率。
結(jié)論：
1.脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑在這兩種細(xì)胞上，表達(dá)綠色熒光蛋白的細(xì)胞比例均比進(jìn)口T公司Lipo2000高，說明其轉(zhuǎn)染效率稍好于進(jìn)口T公司Lipo2000。
2.轉(zhuǎn)染后6小時(shí)不換液（即不去除轉(zhuǎn)染試劑）與換液（即去除轉(zhuǎn)染試劑）相比，表達(dá)熒光蛋白細(xì)胞的數(shù)量并沒有減少，轉(zhuǎn)染效率并沒有降低，且不換液時(shí)與進(jìn)口T公司Lipo2000相比，脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑蛋白表達(dá)量更高，說明其細(xì)胞毒性更低。
3.在細(xì)胞狀態(tài)不好和DNA含量較低的極限情況下，脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染試劑仍能使細(xì)胞表達(dá)一定量的熒光蛋白，說明其抗干擾能力和穩(wěn)定性強(qiáng)。
保存條件
2-4℃保存，有效期一年，避免冷凍。
注意事項(xiàng)
1.質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的優(yōu)化：為達(dá)到最高的轉(zhuǎn)染效率和降低細(xì)胞毒性的影響，可以對(duì)DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例以及細(xì)胞密度進(jìn)行優(yōu)化，一般在1：0.5 ~ 1：5的范圍內(nèi)優(yōu)化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。
2.通常DNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物和細(xì)胞一起孵育6小時(shí)已經(jīng)足夠產(chǎn)生較高的轉(zhuǎn)染效率。大多數(shù)細(xì)胞在本產(chǎn)品轉(zhuǎn)染后長(zhǎng)達(dá)72小時(shí)未見明顯細(xì)胞毒性。但轉(zhuǎn)染后6小時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基對(duì)于一些生長(zhǎng)非常迅速的細(xì)胞有助于提高轉(zhuǎn)染效率；對(duì)于一些易于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞如HEK293T細(xì)胞，換液可視細(xì)胞生長(zhǎng)狀況而定，無需為提高轉(zhuǎn)染效率而換液。
3.使用高純度的DNA（A260/280比值越接近1.8越好）有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。
4.轉(zhuǎn)染前細(xì)胞需處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
5.本產(chǎn)品在不同細(xì)胞上的轉(zhuǎn)染效率不同，轉(zhuǎn)染試劑的添加量需要摸索，具體請(qǐng)參考附表2和附表3。
6.本產(chǎn)品為無菌包裝，無需過濾，請(qǐng)注意無菌取用。
為了您的安全和健康，操作時(shí)請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。
更新時(shí)間：2024-12-30 
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