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基本原理
紫外--可見分光光度法：是根據(jù)物質(zhì)分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。波長長(頻率小)的光線能量小，波長短(頻率大)的光線能量大。 100nm、200nm、400nm、800nm、400um、1m通指X-射線、紫外區(qū)、可見區(qū)、紅外區(qū)、微波區(qū)、無線電波區(qū)
紫外--可見分光光度計：
主要部件：
1、光源：要求光譜的光源，
2、氫燈和鎢燈(350nm)
3、單色器：進(jìn)口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件(棱鏡和光柵)、聚焦透鏡和出口狹縫組成。
4、吸收池：用光學(xué)玻璃制成的吸收池，
5、只能用于可見光區(qū)。用熔融石英(氧化硅)，
6、可見紫外光區(qū)。
7、檢測器：光電池：(硒光電池：用于可見光；硅光電池：紫外可見光) 內(nèi)阻小，光電管：內(nèi)阻高，電流易放大。
8、易疲勞。
9、訊號處理和顯示器

分光光度法對于分析人員來說，可以說是zui有用的工具之一。幾乎每一個分析實(shí)驗(yàn)室都離不開紫外可見分光光度計。分光光度法的主要特點(diǎn)為：
（1）應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收，因此均可借此法加以測定。到目前為止，幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素（除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
（2）靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展，使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展，從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究，使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和準(zhǔn)確度**是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用，在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中，它更受重視，很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
（3）選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定，已有比較滿意的方法了。
（4）準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說，其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi)，如采用示差分光度法測量，則誤差往往可減少到千分之幾。
（5）適用濃度范圍廣
可從常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-6-10-8%）（經(jīng)預(yù)富集后）。
（6）分析成本低、操作簡便、快速

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酶標(biāo)法的基本原理是
將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體，此酶標(biāo)抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng)，并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。當(dāng)加入相應(yīng)底物時，底物被酶催化而呈現(xiàn)出相應(yīng)反應(yīng)顏色，顏色深淺與相應(yīng)抗原或抗體含量成正比。由于此技術(shù)是建立在抗原-抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用的基礎(chǔ)上，因此，具有高度的靈敏性和特異性，是一種極富生命力的免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)。





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